Бул туруучу ДНК electrophoresis бөлүү үчүн колдонулган
TBE чогултуу сыяктуу чакан азыктары сыяктуу кичинекей ДНК сыныктары бөлүү (MW <1000), үчүн айрыкча пайдалуу чектөө энзим дайджесттерди.
TBE көбүрөөк Топтолууда жөндөмдүүлүгүн жана курч токтом берем TAE туруучу . TAE туруучу Tris базасы, уксус кислотасы жана EDTA (Tris-эжеке-EDTA) турган чечим болуп саналат.
TBE TAE караганда кыйла кымбат жана андан кийинки ДНК тазалоочу жана мелер кадамдар арналган болсо, кыйынчылыктарга алып келиши мүмкүн ДНКнын, коркот. артынан үч жөнөкөй кадам менен TBE бөлүп чыгарууга үйрөтүү. Бул аймак түзүү 30 тууралуу көбүрөөк мүнөт созулушу керек. Бул жерде кандай:
EDTA запастарын Solution даярдоо
An EDTA (ethylenediamine tetraacetic кислота) чечим алдын ала даяр болушу керек. EDTA рН чейин чечүүгө толук эмес, турган 8,0 менен жөнгө салынат. 0.5 M EDTA бир 500 миллилитр запасы чечүү үчүн, EDTA disodium туз ичинен 93,05 грамм тартып (FW = 372,2). Анан deionized суу 400 миллилитр менен аны таркатып NaOH менен PH тууралоо. Андан кийин, 500 миллилитр акыркы көлөмүнө чечимге келген.
TBE запастарын Solution даярдоо
Жасоо топтоштурулган (5x) 54 салмагы менен TBE запасы чечим г Tris базасын (FW = 121.14) жана 27,5 г бор кислотасы (FW = 61.83) жана deionized суу болжол менен 900 миллилитр да тарады. Андан кийин 0,5 M EDTA (рН 8,0) 20 миллилитр кошуп, 1 литр акыркы көлөмүнө чечимди өзгөртүүгө.
Бул чечим бөлмө температурасында, ал эми бөлүнүп улуу чечимдерди пайда кылат боюнча сактоого болот. айнек бөтөлкө чекти сактап жана бөлүнүп пайда болсо жокко чыгаруу.
TBE бир жумушчу Solution даярдоо
агароза гел electrophoresis үчүн TBE туруучу 0.5x бир топтолушу (топтоштурулган массасынын 1:10 бөлүштүрүү) колдонулушу мүмкүн. deionized сууга 10x биржа чечүү таарынды. Final эмес чечилсе Бирикмелер 45 мм Антипатриске-borate жана 1 мм EDTA болуп саналат. Чек арадагы пайдалануу үчүн даяр турган агароза гелди чуркап .
What You Need
TBE аймак үчүн, жөн гана төрт заттарды керек. Бул тизмедеги калган даана техника бар. талап кылынган төрт заттар EDTA disodium туз, Tris базасы, бор кислотасы жана deionized суу болуп саналат.
жабдуу үчүн, сиз туура эле рН метр жана калибрлөө стандарттарын, керек. Мындан тышкары, Сиз 600-миллилитр жана 1500-миллилитр стаканы же атыр керек. Сиздин жабдуулар муктаждыктарын түзсө устунга аяктаган жана бекиткичтерин жана дуу октору козгойт.
болот, сен лабораторияга боюнча тизмесин текшерүү сиз баштай электе зарыл нерселер менен камсыз кылыш үчүн пайдалануу керек. Эч нерсе жок, сиз туура материалдарды түгөнгөндө, анткени бул абалга бир чечүү жолун даярдоо ортосунда токтоп ээ мурункусунан да жаман болот.
Сиздин лабораториялык мектепте же жумуш зонадан болсо, анда алар кампасында бардык ден бар экенин көрүп, туура кадрлар менен текшерет. Ошентсек, акыр-аягы силерге убактысын жана күчүн сактап алат.