Бир нече кадам менен бир TAE туруучу кантип жетиш керек Үйрөнүү

Бул Санитардык ДНК кыймылын изилдөө үчүн колдонулат

TAE туруучу Tris базасы, уксус кислотасы жана EDTA (Tris-эжеке-EDTA) турган чечим болуп саналат. Бул тарыхый агароза гел үчүн колдонулган жалпы туруучу болуп electrophoresis натыйжасында ДНК азыктарын анализдеринде УРКнын зайым, ДНК тазалануу протоколдорду же ДНК копиялоо тажрыйба.

Бул чогултуу төмөн иондук күч жана аз Топтолууда мүмкүнчүлүгү бар. Ал мыкты ДНКнын ири (> 20 КБ) даана electrophoresis үчүн ылайыктуу жана көп алмаштыруу керек болот же андан да (> 4 ч) гел Нускасы эсеге recirculated жатат.

Ушуну эске алуу менен, сиз туруучу бир нече жылда карап билсе болот.

Чек арадагы бир убакта бир нече партия менен, айрыкча, убакытты талап же оор өчүрүү жулуп болбошу керек берип, бат эле ишке ашырылат жасап, кадамдарды жасасак болот үчүн кыйын эмес экенин эске алып. Төмөндө көрсөтмөсүн колдонуп, ал TAE аймак үчүн жок эле дегенде, 30 мүнөт убакыт талап кылынат. Бул жерде кандай:

EDTA запастарын Solution даярдоо

An EDTA (ethylenediamine tetraacetic кислота) чечим алдын ала даярдалган. EDTA рН 8,0 эске чейин бир чечимге толук болбойт. 0.5 M EDTA бир 500 миллилитр запасы чечүү үчүн, EDTA disodium туз ичинен 93,05 грамм тартып (FW = 372,2). deionized суу 400-миллилитр менен таркатуу жана натрийдин гидроксиди (NaOH) менен PH тууралоо. 500 миллилитр акыркы көлөмүнө чечүүнү толтуруу.

TAE запасын Solution Up Whip

Жасоо топтоштурулган (50x) Tris базасынын 242 грамм чыгып салмагы менен TAE запасы чечим (FW = 121.14) жана аны болжол менен deionized суу 750 миллилитр тарады.

Кылдаттык менен муз кислотасы жана 0,5 М EDTA 100 миллилитр 57,1 миллилитр кошуу (рН 8,0). Андан кийин, 1 литр акыркы көлөмүнө чечимди өзгөртүүгө. Бул акция чечим бөлмө температурасында сактоого болот. Бул аймак боюнча рН жөнгө салынган эмес, жана 8,5 байланыштуу болушу керек.

Даярдоо TAE бир жумушчу Solution

1x TAE туруучу жумушчу чечим жөн deionized сууга 50x биржа чечимди зыянсыздандырат менен жүргүзүлөт.

Final эмес чечилсе Бирикмелер 40 мм болот. Tris-эжеке менен 1 мм EDTA. Чек арадагы бир агароза гелди чуркап пайдалануу үчүн даяр.

Сиз эмне Buffer үчүн керек

TAE чекти алуу гана көрсөтмөлөрүн тез жана жөнөкөй комплексин талап кылат, демек, ал үчүн зарыл болгон материалдардын саны өтө көп эмес. Сиз жөн гана EDTA disodium туз, Tris базасын жана муз уксус кислотасын керек.

тийиштүү чекти кабыл алуу, ошондой эле, бир рН метр жана калибрлөө стандарттарын талап кылат. Ошондой эле 600 миллилитр жана 1500 миллилитр стаканы же атыр, ошондой эле аяктаган устунга керек. Акыр-аягы, сен deionized суу керек болот, бекиткичтерин көтөрөм жана октору козгойт.

оройт Up

Кайда аймак үчүн эмне кылайын - белгилүү бир мектеп сайтына боюнча, мисалы, үй-бир иш, же башка жерге? Сиз TAE аймак үчүн жогорудагы материалдардын баары бар экенин текшерип баштайт алдында тизмесин текшерүү.

Эгер сенин үйдөн тышкаркы аймак үчүн иштетүү, материалдарды үчүн акы алынбайт келсе сунушталат. Сиз сизге керектүү материалдарды заказ онлайн же алар үчүн адистиги дүкөнү болот.