Джин клондоштуруу бир ген, көчүрмө же клон кабыл алуу болуп саналат. бир ген аныкталып кийин, Бекен менен ЖОЖго жана өнөр жай изилдөөлөрдүн көптөгөн жерлерде колдонсо болот. Генетикалык инженерия жаңы организмдин салып гендерди клондоо же протеин продуктуну өзгөртүү ДНК тизмегин өзгөртүү жараяны болот. Генетикалык инженерия төмөнкүлөр зарыл жол-жоболорду жүзөгө ашыруу үчүн көз каранды.
01 полимераз Chain БООР
02 Restriction Энзимдер
Табылышы энзимдердин чектөө endonucleases деп аталган үчүн абдан маанилүү болгон бир белок инженердик . Бул энзимдер нуклеотид ырааттуулукта негизинде белгилүү бир жерлерден ДНК кесип. Ар кандай чектөө жүздөгөн энзим айкын сайтынан ДНКны кесүү жөндөмдүү, бактериялар көптөгөн ар кандай штаммдарынын бөлүнгөн. бир чектөө энзим менен ДНК жылмаланган ар кандай өлчөмдөрүн, көптөгөн майда бөлүктөрүн чыгарат. Бул гел electrophoresis же колонны аркылуу бөлүнгөн болот.
03 Electrophoresis
бир клетка маданият ДНКны тазалап, же ДНКны элестетүүгө мүмкүн эмес, эгер чектөө энзимдерди көп пайдалануу болмок эмес колдонуп, аны кесип - бул сиздин экстракты бир нерсе бар же жок, же эмне көлөмү сыныктарынан көрүү үчүн кандайдыр бир жол таап, сен "аны бөлүп-бөлүп берчү. Антүүнүн бир жолу гел electrophoresis болот. Гели ДНК киргизет жана Рой аныктоо үчүн кесилип ДНКны көрүп келген, ар кандай максаттарга колдонулат.
04 ДНК эки Каттоо
генетикалык изилдөөлөр, бул көп учурда, ДНКнын эки же андан көп жеке тал байланыштыруу үчүн чектөө энзимдер менен кесип алган тегерек тал кошундулар багытын түзүү, же жабуу зарыл. ДНК тушуна туура деп энзимдер нуклеотид чынжырларынын арасындагы байланыштар байланыштарды түзө алат. энзимдер ДНК полимераз Мен жана нуклеин кислотасы Креатинкиназа тиешелүүлүгүнө жараша, 5 "учтарын кемчиликтерди толтуруу же phosphorylating, бул жол да маанилүү болуп саналат.
05 чакан өзүн-өзү өндүрө алган ДНКнын тандоо
бактериялык генетикалык бир бөлүгү эмес, ДНК чакан тегерек даана, ал эми өзүн-өзү копиялоонун жөндөмдүү, Плазмиддер деп аталат. Плазмиддер көп колдонулат сызыктарын Микроорганизмдердин арасында гендерди ташуу. биотехнология-жылы, бир кызыкчылык ген такталат жана ген жана плазмиддердин да келет чектөө энзимдер тарабынан кыйып жатышат, алар менен чогуу бир рекомбинанттык ДНК деп аталган жалпы байлашат жатышат. Интернетте чагылдырылуусу (Долбоор) ДНК алат cosmids, бактериостатики гендерди камтыган рекомбинанттык Плазмиддер, ошондой эле, бир багытка катары колдонууга болот.
бир Host клетканын ичине бир Vector жылдыруу үчүн 06 ыкмасы
жаңы кабыл алуучу клеткаларга кирип, мындай плазмиддердин бир багытка генетикалык материал өткөрүп берүү жараяны, кайра деп аталат. Бул ыкма алуучу клеткалар аларды "компетенттүү" же багытка убактылуу өткөргүч кылат экологиялык өзгөрүүлөргө дуушар болушун талап кылат. Electroporation ушундай ыкмасы болуп саналат. плазмиддердин көп, ал жердеги клеткалар тарабынан алынып жаткан менен натыйжалуулугу төмөн. Larger ДНК бөлүктөрү дагы жонокой бир методу Долбоор, Ретро- же башка ээледи багыттарын же cosmids менен аталган берилүүсүнүн клондоштуруу жатат. Уколы же ээледи багыттар көп колдонулат калыбына келтирүү дары , бирок татаал, ал тургай рак оорусуна алып, аны каалаган эмес, биз хромосома бөлүктөрүндө ДНК киргизилгендиги кайда алып келиши да мүмкүн.
07 ыкмалары Transgenic микроорганизмдер тандоо
Эмес, бүт клеткалар кайра учурунда ДНКны болот. Бул эмне адамдарды аныктоо ыкмасы бар болушу шарт. Жалпысынан алганда, Плазмиддер антибиотиктерге туруктуулук жана transgenic клеткалар үчүн ошол ген сөз негизинде тандап алса болот жана бул антибиотикти камтыган маалымат каражаттары жөнүндө өсө жөндөмү гендер ашырат. Мисалы, тиешелүүлүгүнө жараша, түсү жана химиялык негизинде тандоо жол х-бийкеч / lacZ системасында, же жашыл химиялык белок, ошондой эле тандоонун башка ыкмалары башка кабарчы протеиндерди катышуусуна көз каранды.